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2017年執(zhí)業(yè)藥師考試藥物分析復習要點第十八章抗生素類藥物

更新時間:2016-12-06 09:11:59 來源:環(huán)球網(wǎng)校 瀏覽92收藏27

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  第十八章 抗生素類藥物

  掌握青霉素鈉、氨節(jié)西林和頭孢羥氨芐的鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測定方法;青霉素V鉀及其片劑的鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測定方法。

  掌握硫酸鏈霉素、硫酸慶大霉素的鑒別、檢查和含量測定方法。 熟悉羅紅霉素的鑒別、檢查和含量測定方法。 熟悉鹽酸美他環(huán)素的鑒別、檢查和含量測定方法。

  第一節(jié) 青霉素鈉的分析

  青霉素族中的母核為6-氨基青霉烷酸(簡稱6-APA),游離羧基酸性,能與無機堿或某些有機堿成鹽。青霉素母核無紫外吸收,而芐基取代基有紫外吸收。β-內(nèi)酰胺環(huán)不穩(wěn)定,遇酸、堿、青霉素酶及某些金屬離子等作用,易發(fā)生水解和分子重排,導致β-內(nèi)酰胺環(huán)的破壞而失去抗菌活性。

  一、鑒別

  1.抑菌實驗 通過對金黃色葡萄球菌的抑制作用進行鑒別。加入青霉素酶培養(yǎng)后無抑菌作用,同法檢查未經(jīng)青霉素酶滅活的有抑菌作用。

  2.沉淀反應 本品為鈉鹽,加稀鹽酸使成酸性,生成分子型,難溶于水即白色沉淀。此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或過量的鹽酸(與酰胺基成鹽)中溶解。

  2.紅外光譜法

  4.鈉鹽焰色反應 火焰鮮黃色。

  二、檢查

  1.吸收度 側(cè)鏈苯環(huán)在264nm有最大吸收,而降解產(chǎn)物在280nm有最大吸收。規(guī)定二波長處吸收度值范圍。

  測定264nm吸收度為控制青霉素鈉含量。規(guī)定280nm吸收度為控制雜質(zhì)限量。

  2.水分 本品遇水易水解,費休法測定水分不得超過0.5%。

  2.細菌內(nèi)毒素 細菌內(nèi)毒素檢查法。利用鱟試劑與細菌內(nèi)毒素發(fā)生凝集反應,來判斷內(nèi)毒素是否符合規(guī)定。

  4.無菌 滅活后,無菌檢查法檢查。

  三、含量測定:

  汞量法。青霉素水解后,其堿性水解產(chǎn)物青霉噻唑酸及青霉胺都能與汞鹽定量反應,根據(jù)消耗汞鹽量可計算青霉素含量。

  注意事項

  1.滴定前加1mol/L氫氧化鈉5ml,使藥物水解為青霉噻唑酸并繼續(xù)水解為青霉胺,才能與Hg2+反應。

  2.水解后加等量硝酸中和,再加pH 4.6醋酸鹽緩沖液,方能滴定。

  2.采用電位滴定法。滴定曲線出現(xiàn)兩個突躍,計算時以第二個突躍為準,此時反應摩爾比為1:1。

  4.空白試驗也要稱取樣品,但不經(jīng)水解直接滴定,以消除樣品中降解產(chǎn)物對測定影響。

  5.青霉素百分含量為總青霉素百分含量與降解產(chǎn)物百分含量之差。

  第二節(jié) 青霉素V鉀及其片劑的分析

  一、鑒別

  1.水解反應 在青霉素酶作用下,β-內(nèi)酰胺環(huán)水解開環(huán),生成羧酸,使溶液轉(zhuǎn)為酸性。本法專屬性強。

  2.紫外分光光度法 核對藥物的λmax及兩波長處吸收度比值

  2.紅外光譜法

  4.鉀鹽焰色反應 火焰紫色

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  二、檢查

  1.吸收度 測定306nm吸收度,控制雜質(zhì)限量;測定274nm吸收度控制藥物含量。

  2.水分 費休法測定水分不得超過 1.5%。

  三、含量測定 1.原料藥 汞量法,方法與青霉素鈉相同 2.片劑 硫醇汞鹽法

  青霉素在咪唑催化下與氯化高汞定量反應轉(zhuǎn)化成青霉烯酸硫醇汞鹽,在325nm處有最大吸收,分光光度法測定吸收度,對照品比較法計算含量。

  第三節(jié) 氨芐西林的分析

  一、鑒別 紅外光譜法

  二、檢查 1.N,N-二甲基苯胺的檢查:采用氣相色譜法,以萘為內(nèi)標計算。含N,N-二甲基苯胺不得過百分之二十。

  2.水分 含3分子結(jié)晶水,按費休法測定含水應為1 2.0~1 5.0%

  三、含量測定 高效液相色譜法,外標法計算含量。

  第四節(jié) 頭孢羥氨芐的分析

  一、鑒別 1.色譜法 與對照品保留時間一致 2.紅外光譜法

  二、檢查

  1.有關(guān)物質(zhì) 主要檢查α-對羥基苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸及其他有關(guān)物質(zhì)。采用薄層色譜法檢查。前兩者用對照品比較法,其他雜質(zhì)用高低濃度對比法。

  2.水分 含1分子結(jié)晶水,按費休法測定含水應為 4.2~6.0%

  三、含量測定 高效液相色譜法,外標法計算含量。

  第五節(jié) 硫酸鏈霉素和硫酸慶大霉素的分析

  一、鑒別

  (一) 硫酸鏈霉素

  1.茚三酮反應 鏈霉素分子中有α-羥基胺結(jié)構(gòu),可與茚三酮縮合成藍紫色化合物。

  2.N-甲基葡萄糖胺反應 鏈霉素水解產(chǎn)生N-甲基葡萄糖胺,在堿性溶液中與乙酰丙酮縮合,再與二甲氨基苯甲醛醇溶液反應生成紅色縮合物。

  2.麥芽酚反應 在堿性溶液中鏈霉糖重排形成麥芽酚,可與Fe3+在微酸性溶液中形成紫紅色配合物。

  4.坂口反應 鏈霉胍顯色反應。水解生成鏈霉胍,與8-羥基喹啉、次溴酸鈉反應生成橙紅色化合物。

  5.硫酸鹽鑒別

  (二) 硫酸慶大霉素 1. 茚三酮反應 2. N-甲基葡萄糖胺反應 2.薄層色譜法

  二、檢查

  (一) 硫酸鏈霉素 1.干燥失重 受熱易分解,采用恒溫減壓干燥法 2.異常毒性 2.熱原 4.降壓物質(zhì) 5.無菌 本身有抗菌作用,采用過濾法。用微孔濾膜濾除藥物溶液,取濾膜試驗。

  (二) 硫酸慶大霉素

  1.水分 按費休法測定含水不得超過1 5.0%

  2.硫酸鹽 配位滴定法

  先加入定量過量氯化鋇滴定液,形成硫酸鋇沉淀。剩余Ba2+再用EDTA滴定液滴定。本品含硫酸鹽應為3 2.0~3 5.0%。

  2.異常毒性

  4.細菌內(nèi)毒素

  5.降壓物質(zhì)

  6.C組分檢查 HPLC

  慶大霉素為C組分復合物,其不同C組分活性無明顯差異,但其毒副作用不同,需控制其相對含量。

  三、含量測定 微生物檢定法

  第六節(jié) 羅紅霉素的分析

  一、鑒別 1.薄層色譜法 比較供試品與對照品斑點顏色和位置。 2.紅外光譜法

  二、檢查 1.堿度 測定pH值 2.有關(guān)物質(zhì) TLC,高低濃度對比法 2.水分 按費休法測定含水不得超過 2.0%

  由于本品酮基可與甲醇反應生成水,故用吡啶代替甲醇作溶劑。

  4.異常毒性

  三、含量測定 微生物檢定法

  第七節(jié) 鹽酸美他環(huán)素的分析

  一、鑒別

  1.紫外分光光度法 測定最大吸收波長和相應吸收度

  2.高效液相色譜法 供試品與對照品保留時間一致

  2.氯化物鑒別反應

  二、檢查

  1.雜質(zhì)吸收 控制本品中差向異構(gòu)體、脫水異構(gòu)體及其他雜質(zhì)。此類雜質(zhì)在490nm波長有較強吸收,控制樣品在490nm吸收度,達到控制雜質(zhì)的目的。

  2.有關(guān)物質(zhì) 控制生產(chǎn)中引入的土霉素。HPLC,主成分自身對照法

  三、含量測定

  HPLC,外標法計算。

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