雜交瘤細胞的凍存_2016臨床檢驗醫(yī)學初級檢驗師考試輔導精華
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及時凍存原始孔的雜交瘤細胞(環(huán)球網校醫(yī)學考試網提供雜交瘤細胞的凍存相關知識點輔導)每次克隆化得到的亞克隆細胞是十分重要的。因為在沒有建立一個穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候,細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能發(fā)生細胞的污染、分泌抗體能力的喪失等等。如果沒有原始細胞的凍存,則可因上述意外而前功盡棄。
雜交瘤細胞的凍存方法同其他細胞系的凍存方法一樣,原則上細胞應在每支安瓿含1×106以上,但對原始孔的雜交瘤細胞可以因培養(yǎng)環(huán)境不同而改變,在24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng),當長滿孔底時,一孔就可以裝一支安瓿凍存。
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細胞凍存液:50%小牛血清;40%不完全培養(yǎng)液;10%DMSO(二甲基亞砜)。
凍存液最好預冷,操作動作輕柔、迅速。(環(huán)球網校醫(yī)學考試網提供雜交瘤細胞的凍存相關知識點輔導)凍存時從室溫可立即降至0℃后放入-70℃超低溫冰箱,次日轉入液氮中。也可用細胞凍存裝置進行凍存。凍存細胞要定期復蘇,檢查細胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性,在液氮中細胞可保存數(shù)年或更長時間。
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