2014年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師免疫學(xué)考試輔導(dǎo)：體液免疫功能的檢測

　　2014年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師免疫學(xué)考試輔導(dǎo)之體液免疫功能的檢測，環(huán)球網(wǎng)校醫(yī)學(xué)考試網(wǎng)搜集整理相關(guān)考試輔導(dǎo)資料供考生們參考，希望對大家有所幫助。

　　臨床上一個反復(fù)發(fā)作的化膿感染，常使醫(yī)生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原發(fā)免疫缺陷發(fā)病年齡很小，而繼發(fā)免疫缺陷病人多在30歲以上。絕大多數(shù)免疫缺陷病人多表現(xiàn)為體液和細胞免疫同時受損，所以應(yīng)全面檢查這兩方面的功能。遺憾的是，目前應(yīng)用的檢測方法的局限性，其結(jié)果常難以得出明確結(jié)論。

　　一、免疫球蛋白的定量檢測

　　1.血清免疫球蛋白的測定　血清免疫球蛋白(Ig)的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法。由于目前還沒有發(fā)現(xiàn)由IgD和IgE缺陷所致疾病，所以通常檢測IgG、IgM、IgA，這三類Ig就可以代表血清Ig的水平(表20-2)。檢測發(fā)現(xiàn)三類Ig水平均明顯低下，就可考慮體液免疫缺陷。但在分析兒童 Ig水平時，應(yīng)注意Ig的水平隨年齡而變化。體液免疫功能缺陷首先考慮患者血清Ig　水平，如果所有類別Ig水平均降低，即稱為一般性聯(lián)低丙種球蛋白血癥。如果免疫球蛋白水平極度低下，或IgG、IgM、IgA,三類Ig總量低于2mg/ml則稱為嚴(yán)重低丙種球蛋白血癥或無丙種球蛋白血癥 (agammaglobulinemia)。如果只一種或兩種Ig水平降低，則稱為異常丙種球蛋白血癥(dysgammaglobulinemia)。一般性低丙種球蛋白血癥多見于繼發(fā)性免疫缺陷病。無丙種球蛋白血癥常見于原發(fā)免疫缺陷病。但是常有約50%IgA缺陷病人無臨床癥狀，伴有反復(fù)感染的IgA 缺陷病人常同時有IgG的缺陷。常規(guī)的定量檢測血中Ig的方法是單向免疫擴散和免疫比濁法。

　　2.分泌型IgA(SIgA)的測定 SIgA是粘膜抗感染的重要因素，但是粘膜抗感染還包括少量滲出的IgM和IgG，還有細胞免疫的作用。由SIgA缺陷病人?？蓹z測出針對牛奶或其他食物蛋白的沉淀抗體和自身抗體，說明機體對抗原蛋白質(zhì)吸收異常，同時也存在免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)的功能紊亂。一般來說血清IgA缺陷病人常伴有SIgA缺陷，反之亦然。說明在機體中血清IgA和SIgA之間有某種生物相關(guān)性。最近也有報導(dǎo)少數(shù)SIgA缺陷病人的血清IgA水平正常，因而分別檢查血清中和分泌液中 IgA水平還是有必要的。目前用免疫比濁法可較精確地測定分泌液中IgA時和IgM和IgC水平。在用單向免疫擴散和免疫比濁法定量IgA時，因抗血清是針對這兩型共有的α鏈的，故不能區(qū)分SIgA和血清來源的IgA。而應(yīng)用抗分泌小體的抗體用酶免疫分析法，可區(qū)分血清IgA和分泌型IgA,并可對 SIgA進行定量。

　　二、常見抗體的測定

　　檢測體液免疫功能的另一種方法是定量測定正常人體內(nèi)的幾種常見的抗體水平。常見的抗體通常是指嗜異性凝集素、抗溶血素O抗體以及麻疹病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒的抗體。

　　在嚴(yán)重免疫缺陷病人缺乏上述抗體，常見抗體的缺損可驗證或支持免疫蛋白測定的結(jié)果。然而對于比較復(fù)雜的免疫缺陷，由于這類抗體主要反映過去的免疫應(yīng)答能力，此外這種初次應(yīng)答能力持續(xù)期短，易于消退，所以對新近發(fā)生的繼發(fā)性免疫缺陷的診斷幫助不大。

　　三、B細胞數(shù)目及功能的檢測

　　原發(fā)性免疫缺陷和繼發(fā)性免疫缺陷均可導(dǎo)致體液免疫功能下降。原發(fā)性體液免疫功能缺陷可能由于B細胞分化障礙，細胞內(nèi)合成Ig功能紊亂或由于抑制性細胞功能過強。繼發(fā)性體液免疫功能降低可能由于蛋白質(zhì)大量丟失，蛋白質(zhì)吸收障礙、營養(yǎng)不良、免疫抑制治療的副作用，病毒感染(艾滋病)等。在診斷原發(fā)性體液免疫功能缺損中可檢查B細胞的數(shù)目和功能以確定造成缺損的原因。

　　1.外周血B細胞數(shù)目的檢測首先進行常規(guī)的外周血白細胞總數(shù)和分類計數(shù)檢查，這些結(jié)果是評價病人免疫系統(tǒng)功能狀態(tài)的基本資料。由于在全血中淋巴細胞所占比例很少，而T細胞和B細胞不能藉形態(tài)學(xué)特征分類，所以外周血B細胞數(shù)檢測需先從全血分離出富含淋巴細胞的單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell,PBM)。再依靠B細胞表面有免疫球蛋白分子或其他特征來檢查B細胞。常用的方法是將待檢者的PBM用FITC標(biāo)記的免疫抗人Ig作直接免疫熒光染色，在熒光顯微鏡下顯熒光的細胞為帶有表面免疫球蛋白的B細胞。正常人B細胞的約占PBM的10%。

　　2.外周血B細胞功能的檢測 分離受檢者血液PBM細胞，體外培養(yǎng)時加入B細胞刺激物如RWM(美洲商陸刺激素)或SAC(金黃色莆萄球菌來源的刺激物)后由B細胞變成Ig分泌細胞的數(shù)量。體液免疫功能缺損患者，其PBM對PWM和SACA刺激的反應(yīng)降低，產(chǎn)生Ig分泌細胞數(shù)正常人顯著減少。在進一步檢查這種免疫缺損的原因，則應(yīng)檢查是由B細胞或TH細胞缺損所致，還是由于TS細胞數(shù)量或活性增強引起的。

　　抗體形成細胞計數(shù)：檢查人類Ig分泌細胞是用反向溶血空斑檢測 (reversed hemolytic　plaque assay)法。將待檢人的PBM、用SPA包被的SRBC(SPA-SRBC)、兔抗人Ig抗體、補體四種成分混合，灌入用兩張玻片做成的小室，密封好，放入溫箱培養(yǎng)1-3小時，，在此期間，作為抗人Ig抗體的免疫IgG的FC段可與SRBC表面SPA結(jié)合，當(dāng)Ig分細胞分泌出游離的Ig分子時，這些人Ig分子與SRBC表面的抗人Ig抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物，即可活化補體，使SPA-SRBC溶解，因此在Ig分泌細胞周圍形成一個圓形的溶血區(qū)，稱為溶血空斑，每一個溶血的空斑就代表一個Ig分泌細胞。

　　檢查小鼠Ig分泌細胞應(yīng)用的溶血空斑試驗比較簡單，即SRBC免疫注射小鼠，4天后取脾制成單個細胞懸液，加入一定量SRBC(靶細胞)混合，在補體參加下，產(chǎn)生抗體的細胞分泌出的Ig與SRBC(抗原)結(jié)合在補體作用下，溶血，表現(xiàn)肉眼可見的溶血空斑。計數(shù)空斑數(shù)代表分泌抗體的細胞數(shù)。

相關(guān)推薦：

2014年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試免疫學(xué)復(fù)習(xí)資料總結(jié)

2014年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師醫(yī)學(xué)免疫學(xué)歷年考點歸納匯總

編輯推薦：

臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師輔導(dǎo)報名

2014年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試網(wǎng)絡(luò)輔導(dǎo)招生簡章

2014年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師頂級輔導(dǎo)課程（簽訂協(xié)議?不過退費?免費重學(xué)）

國內(nèi)獨家揭秘：2013年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師真題解析（免費高清直播公開課）