2013檢驗(yàn)主管技師血液檢驗(yàn)：紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)及其應(yīng)用

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　　紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)包括紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)、自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)、酸化甘油溶血試驗(yàn)、蔗糖溶血試驗(yàn)、酸化血清溶血試驗(yàn)、紅細(xì)胞膜蛋白電泳分析。

　　1.紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)

　　(1)原理：檢測紅細(xì)胞對不同濃度低滲鹽溶液的抵抗力。紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中，當(dāng)水滲透其內(nèi)部達(dá)一定程度時，紅細(xì)胞發(fā)生膨脹破裂。根據(jù)不同濃度的低滲鹽溶液中紅細(xì)胞溶血的情況，通過紅細(xì)胞表面積與容積的比值，反映其對低滲鹽溶液的抵抗性。比值愈小，紅細(xì)胞抵抗力愈小，滲透脆性增加。反之抵抗力增大。

　　參考值：開始溶血0.44%～0.42%(NaCl液)，完全溶血0.34%～0.32%(NaCl液)。

　　(2)臨床意義：脆性增高見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥、橢圓形細(xì)胞增多癥等;降低見于阻塞性黃疸、珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血等。

　　2.自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)

　　(1)原理：紅細(xì)胞在37℃孵育48小時，其間由于膜異常引起鈉內(nèi)流傾向明顯增加，ATP消耗過多;或糖酵解途徑酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可導(dǎo)致溶血，稱為自身溶血試驗(yàn)。在孵育時，加入葡萄糖或ATP作為糾正物，觀察溶血可否有一定的糾正，稱為糾正試驗(yàn)。

　　參考值：48小時內(nèi)不加糾正物的溶血度小于3.5%，加葡萄糖溶血度小于1.0%，加ATP的溶血度小于l.0%

　　(2)臨床意義：膜缺陷患者溶血度增加，加糾正物可被糾正;G6PD缺陷癥者溶血度輕度增加，能被葡萄糖糾正;自身免疫性溶貧溶血度輕度增加，加葡萄糖無預(yù)示價值;PNH本試驗(yàn)常正常。

　　3.酸化甘油溶血試驗(yàn)

　　(1)原理：當(dāng)甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時，可阻止其中的水快速進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，使溶血過程緩慢。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜脂質(zhì)減少。當(dāng)紅細(xì)胞膜蛋白及膜脂質(zhì)有缺陷時，它們在pH6.85甘油緩沖液中比正常紅細(xì)胞溶解速度快，導(dǎo)致紅細(xì)胞懸液的吸光度降至50%的時間(AGLT50)明顯縮短。

　　參考值：AGLT50大于1800s(30min)

　　(2)臨床意義：減少見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥(25～150s)、腎功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶貧和妊娠婦女。

　　4.蔗糖溶血試驗(yàn)：為PNH簡易重要的篩查試驗(yàn)。

　　(1)原理：是根據(jù)PNH患者的紅細(xì)胞，在低離子強(qiáng)度醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集整理的蔗糖溶液中對補(bǔ)體敏感性增強(qiáng)，經(jīng)孵育，補(bǔ)體與紅細(xì)胞膜結(jié)合加強(qiáng)，蔗糖溶液進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致滲透性溶血而設(shè)計的。

　　參考值：定性試驗(yàn)：正常為陰性;定量試驗(yàn)：正常溶血率<5%。

　　(2)臨床意義：PNH患者為陽性或溶血率增加，可作為PNH的篩選試驗(yàn)。自免溶貧有的可為陽性，白血病、骨髓硬化時可出現(xiàn)假陽性。

　　5.酸化血清溶血試驗(yàn)

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　　(1)原理：陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)患者體內(nèi)存在對補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞。酸化血清溶血試驗(yàn)，也稱Ham test，即紅細(xì)胞在酸性(pH6.4～6.5)的正常血清中孵育，補(bǔ)體被激活，PNH紅細(xì)胞破壞而產(chǎn)生溶血。而正常紅細(xì)胞不被溶解，無溶血現(xiàn)象。

　　結(jié)果：陰性。

　　(2)臨床意義：是PNH的確診試驗(yàn)。陽性主要見于PNH，某些自身免疫性溶血性貧血發(fā)作嚴(yán)重時可呈陽性。

　　6.紅細(xì)胞膜蛋白電泳分析

　　(1)原理：將制備的紅細(xì)胞膜樣品進(jìn)行SDS-PAGE電泳，根據(jù)樣品中各蛋白相對分子質(zhì)量的不同，分離得到紅細(xì)胞膜蛋白的電泳圖譜，從而可見各膜蛋白組分百分率。

　　參考值：各種膜蛋白組分百分率變化較大，多以正常紅細(xì)胞膜蛋白電泳圖譜作比較?；蛞詭?蛋白為基準(zhǔn)，各膜蛋白含量以與帶3蛋白的比例表示。

　　(2)臨床意義：許多溶血性疾病常見紅細(xì)胞膜蛋白異常。各種膜缺陷疾病如遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥有收縮蛋白等含量減低或結(jié)構(gòu)異常。某些血紅蛋白病骨架蛋白等可明顯異常。