初級檢驗(yàn)技士考試輔導(dǎo):微生物學(xué)檢查
初級檢驗(yàn)技士考試輔導(dǎo):微生物學(xué)檢查 $lesson$
微生物學(xué)檢查
1、標(biāo)本采集:根據(jù)不同疾病采集不同標(biāo)本,血液、尿液、糞便及食物。腸熱癥的第1、2周取血液,第2、3周取糞便與尿液。整個(gè)病程中骨髓分離細(xì)菌陽性率較高。食物中毒采集食物與糞便。
2、檢驗(yàn)方法及鑒定
1、直接檢測:商品膠乳凝集試劑,快速檢出沙門菌和志賀菌。
2、分離培養(yǎng):
1)糞便:一般將糞便或肛拭直接接種于SS和麥康凱平板上,用兩種培養(yǎng)基的目的是提高標(biāo)本的陽性檢出率。
2)血液和骨髓:抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml,立即接種于含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管中進(jìn)行增菌,48小時(shí)將培養(yǎng)物移種到血平板和腸道鑒別培養(yǎng)基上,若有細(xì)菌生長取菌涂片革蘭染色并報(bào)告結(jié)果。對增菌培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)7天,仍無細(xì)菌生長時(shí),則報(bào)告陰性。
3)尿液:取尿液2-3ml經(jīng)硫磺酸鹽肉湯增菌后,再接種于腸道菌選擇培養(yǎng)基或血平板上進(jìn)行分離培養(yǎng),亦可將尿液離心沉淀物分離培養(yǎng)。
4)局部感染的膿液。
3、鑒定:沙門菌屬的鑒定與志賀菌屬相同,須根據(jù)生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定兩方面進(jìn)行。
(1)初步鑒定:如為革蘭陰性桿菌時(shí)作氧化酶試驗(yàn),陰性時(shí),挑取可疑菌落分別接種于KIA和MIU上,并作生化反應(yīng)。以沙門菌多價(jià)診斷血清作玻片凝集試驗(yàn)。
凡符合KIA:K/A、產(chǎn)氣+/-、H2S+/-、MIU:動(dòng)力+、吲哚-、脲酶+、氧化酶-,觸酶+,硝酸鹽還原+,以沙門菌多價(jià)血清作玻片凝集試驗(yàn)陽性,鑒定為沙門菌屬。
(2)最后鑒定:沙門菌血清學(xué)鑒定主要借助于沙門菌O抗原多價(jià)血清與O、H、Vi抗原的單價(jià)因子血清。甲型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌和傷寒沙門菌分別屬于A、B、D血清型。
(3)血清學(xué)診斷:肥達(dá)試驗(yàn):用已知的傷寒沙門菌O、H抗原,副傷寒沙門菌甲、乙H抗原稀釋后,與被檢血清作定量凝集試驗(yàn),以檢測患者血清中抗體的含量,來判斷機(jī)體是否受沙門菌感染而導(dǎo)致腸熱癥,并判斷沙門菌的種類。
菌體抗原(O抗原)――顆粒狀凝集
鞭毛抗原(H抗原)――絮狀凝集
一般傷寒O>1:80;H>1:160有臨床意義;
副傷寒A、B、C>1:80有臨床意義
若第二次效價(jià)比第一次高4倍以上具有診斷價(jià)值。
O抗原為IgM,出現(xiàn)早,持續(xù)存在時(shí)間較短。
H抗原為IgG出現(xiàn)較遲,持續(xù)存在時(shí)間較長。
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