檢驗主管技師:葡萄糖-胰島素釋放試驗(2)
更新時間:2010-09-16 13:22:10
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檢驗主管技師:葡萄糖-胰島素釋放試驗(2)
方法:實(shí)驗前后準(zhǔn)備同OGTT(試驗前病人應(yīng)禁食10-16h,坐位取血后5分鐘內(nèi)飲入250ml 含75g無水葡萄糖的糖水,以后每隔30分鐘取血一次,共4次,歷時2h。整個試驗中不可吸煙,喝咖啡、茶和進(jìn)食。兒童給予葡萄糖量為1.75g/kg,但最多不超過75g。)如已知為糖尿病人則選用饅頭餐代替口服葡萄糖。取血同時進(jìn)行葡萄糖和胰島素測定。
以往胰島素測定方法:采用放射免疫競爭雙抗體——PEG法。用125I標(biāo)記的胰島素與標(biāo)本中胰島素一起競爭結(jié)合抗胰島素抗體上的結(jié)合位點(diǎn),再用二抗結(jié)合胰島素抗體,以PEG沉淀胰島素與雙抗體的復(fù)合物,并測定沉淀物的放射性計數(shù),計數(shù)的高低與標(biāo)本中胰島素的含量成反比。
現(xiàn)在胰島素測定方法:采用化學(xué)發(fā)光法。即標(biāo)本中的胰島素和包被于固相磁珠或固相上的單克隆抗體及標(biāo)記有酶或電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)的單克隆抗體形成雙抗體夾心復(fù)合物,通過磁場或沖洗除去未反應(yīng)的標(biāo)記單克隆抗體,加入酶低物使之顯色或通電使電化學(xué)發(fā)光物質(zhì)形成激發(fā)態(tài)發(fā)射光子,底物顯色強(qiáng)度或發(fā)光強(qiáng)度與胰島素含量成正比。
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