黃酮類化合物的提取分離(中藥化學(xué))
更新時(shí)間:2009-10-19 15:27:29
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一、提取 黃酮苷和極性較大的苷元:甲醇,乙醇,甲醇-水(1:1),丙酮,乙酸乙酯。 多糖苷:沸水 花色苷:0.1%鹽酸進(jìn)行提取。 苷元:氯仿,乙醚,乙酸乙酯。 注意:苷類提取防止酶解。 (一)溶劑萃取法:自浸膏中先用乙醚萃取苷元,再用乙酸乙酯反復(fù)萃取苷,最后用正丁醇萃取極性較大的苷。 (二)堿提酸沉法 (1) 常用堿水:石灰水,Na2CO3,稀NaOH,堿性稀醇。 酸沉:鹽酸 注意:酸堿濃度不宜過高。 堿性過強(qiáng),破壞黃酮母核;酸性過強(qiáng),生成佯鹽,影響產(chǎn)率。 石灰水:可除去鞣質(zhì),果膠,粘液質(zhì),有利于純化。但浸出效果不及NaOH ,且有些黃酮可與鈣結(jié)合成不溶性沉淀。 稀NaOH:浸出效率高,但雜質(zhì)多。 二、分離方法 分離的基本依據(jù): 極性差異、酸性強(qiáng)弱、分子大小和特殊結(jié)構(gòu)。 (一)柱色譜法 1、硅膠柱色譜法 適于分離異黃酮,二氫黃酮(醇)和高度甲基化或乙酰化的黃酮及黃酮醇類。 分離苷元時(shí):氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。 分離苷時(shí):氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水 2、聚酰胺柱色譜 適于黃酮類化合物的分離。 規(guī)律: A:苷元相同時(shí),以含水移動(dòng)相洗脫,被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?nbsp; 苷元>單糖苷>雙糖苷>雙糖鍵苷。 B:與酚羥基的數(shù)目有關(guān),數(shù)目越多,吸附力越強(qiáng)。與酚羥基的位置有關(guān),如果酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵,則吸附力減弱。 查耳酮>二氫黃酮, 黃酮>二氫黃酮 C:不同類型黃酮類化合物,被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋狐S酮醇>黃酮>二氫黃酮>異黃酮。 D:分子內(nèi)芳香化程度越高,共軛雙鍵越多,則吸附力越強(qiáng)。 3、葡聚糖凝膠色譜法 凝膠類型:Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類型的凝膠。 分離苷元時(shí):利用吸附作用,游離酚羥基數(shù)目越多,則吸附力越強(qiáng),越難洗脫。 分離苷時(shí):主要靠分子篩,洗脫時(shí)按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。 黃酮類化合物 取代基 Ve/Vo 芹菜素 5,7,4‘-三羥基 5.3 木犀草素 5,7,3‘,4’-四羥基 6.3 槲皮素 3,5,7,3',4'-五羥基 8.3 楊梅素 3,5,7,3‘,4’,5‘-六羥基 9.2 山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3 半乳糖-7-鼠李糖苷 槲皮素-3-蕓香糖苷 雙糖苷 4.0 槲皮素-3-鼠李糖苷 單糖苷 4.9 常用的洗脫劑:堿性水溶液,含鹽水溶液、醇及含水醇 (二)PH梯度法:用不同濃度的堿分離 (三)硼酸絡(luò)合法 具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡(luò)合生成易溶于 水的化合物。 |
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