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2013年初級藥師考試微生物學:細菌的基因突變類型

更新時間:2012-11-02 10:41:46 來源:|0 瀏覽0收藏0

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  在明確了細菌培養(yǎng)環(huán)境條件僅起選擇作用后,學者們采用了一些選擇方法以獲得突變株,這些突變株的應用對研究遺傳變異及開展有基因工程都很有幫助。大從數(shù)利用的突變型均為大腸桿菌或鼠傷寒沙門氏菌,因這兩種細菌營養(yǎng)要求不高,僅需鹽、微量金屬離子及有限的氮、碳來源即可生長繁殖。未發(fā)生突變的菌株稱為野生型,而發(fā)生突變的菌株則根據(jù)選擇條件可分為:

  1.營養(yǎng)缺陷型:突變后因某種酶的缺失需要額外添加某種營養(yǎng)成份方能生長繁殖者。一般用“+”代表能利用自然存在的某種成份或能合成某種成份的中間體,而“―代表不能合成該成份的菌株。如his-則代表組氨酸缺陷型,需在培養(yǎng)基中加入組氨酸。

  2.抗性突變型:一般以S代表對化學藥物或抗生素敏感,r代表有抵抗力。如str8代表該菌株對鏈霉素敏感,在有鏈霉素存在時不能生長。這類突變型最易獲得,應用亦廣。

  3.發(fā)酵陰性突變型:突變后失去發(fā)酵某種糖的能力但仍能利用其他糖做為碳源。這是由于突變后失去能分解該糖的酶。由于乳糖發(fā)酵可用指示劑根據(jù)pH改變而顯示,故可Lac-(乳糖發(fā)酵陰性)突變株作為研究工具。

  圖5-2 細菌影印培養(yǎng)試驗

1.從普通培養(yǎng)基上將皿上長的細菌,用絲絨影印至含鏈霉素培養(yǎng)基上,耐菌細菌不多。
2.從不接觸鏈霉素的平皿上,按影印顯示耐鏈霉素菌落區(qū)挑取細菌增菌。
3.將102細菌接種普通培養(yǎng)基上再作影印,再按耐鏈霉素平皿上相應菌落處接種增菌。
4.未接觸鏈霉素的平皿上,全部細菌均耐鏈霉素。

  4.條件致死性突變型:在某一條件下具有致死效應,突變株不能生長,但在另一沒有致死效應的條件下仍可生長。最常用者為溫度敏感性突變型。它們在親代能生長的溫度范圍內(nèi)特別是較高濕度(42℃)不能生長,但在較低溫度(25℃)則能生長。這種菌株稱為ts株。其發(fā)生的原因是某些酶的肽鏈結構發(fā)生改變后,降低了酶的抗熱性。因此在較高溫度下不能生存。這種用溫度篩選突變株的方法比較簡便,應用較多。

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